Clonación y secuenciación de NBS-LRR: secuencias análogas a genes de resistencia en albaricoquero

Abstract

Genes de resistencia en plantas (NBS-LRR resistance genes) procedentes de distintas especies: tabaco (Whitham et al. 1994), arabidopsis (Parker et al. 1997), lino (Lawrence el al.1995) y tomate (Milligan et al.1998) fueron clonados y se observó que conferían resistencia a un amplio rango de enfermedades causadas por virus, bacterias, hongos y nemátodos. Además, los dominios de estos genes están ampliamente conservados entre especies, por lo que fue posible, mediante PCR con cebadores degenerados, amplificar secuencias análogas en otras especies vegetales. Estas secuencias se demostró que correspondían a genes candidatos de resistencia o análogos de genes de resistencia (RGAs). Análisis genéticos demostraron que los RGAs están repetidos de forma abundante en el genoma, estas copias están organizadas en “clusters” y fuertemente ligadas a loci de resistencia conocidos. Como parte del estudio de identificación y clonación de genes de resistencia al virus de la sharka o PPV, en este trabajo se han amplificado mediante oligos degenerados secuencias análogas a genes de resistencia de albaricoquero, dichos fragmentos se clonaron, se secuenciaron y se comprobó que correspondían a RGAs.